转录因子(transcription factor,TF)是一群能与基因5`端上游特定序列专一性结合,从而保证目的基因以特定的强度在特定的时间与空间表达的蛋白质分子。研究TF的主要内容是研究蛋白质与DNA之间的相关作用。

  1. 基于微球免疫分析检测转录因子活性的方法(Microsphere-based immunoassay to measure the activity of transcription factors, MIA-TF)

原理:连有抗体的荧光微球与待测样品混合后,如果有待测抗原存在的话,微球散射的荧光将会不同,抗原存在与否所影响的光散射的不同可以测定抗原。

方法:生物素标记dsDNA与蛋白样品形成DNA/蛋白复合物后,用亲和素耦联的微球捕获DNA/蛋白复合物, 再使微球表面的DNA/蛋白复合物与蛋白抗体和荧光标记的二抗结合, 最后用流式细胞仪分析微球的荧光来报告转录因子活性。

优点:

  1. 以单个微球作为独立分析单位
  2. 多拷贝重复测定
  3. 多参数同步分析